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CRE慢病毒
背景介紹


Cre重組酶,是來源于大腸桿菌噬菌體P1的一種類型I的拓樸異構酶(Type I topoisomerase), 也是一種酪氨酸重組酶(tyrosine recombinase。


LoxP位點,是位于P1噬菌體中的34bp序列,由兩個13bp的反向回文序列和8bp的中間間隔序列共同組成,間隔序列決定loxP的方向,loxP 位點的序列如下所示:

    13bp                         8bp           13bp

ATAACTTCGTATA-NNNTANNN-TATACGAAGTTAT


Cre重組酶不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能識別特異的DNA序列,即loxP位點,使兩個loxP位點間發生基因重組。Cre重組酶無需借助任何輔助因子,可作用于多種結構的DNA底物,如線形、環狀甚至超螺旋DNA。


由于Cre/loxP系統作用方式高效簡單,Cre/LoxP定位重組系統已在特定基因的刪除、基因功能的鑒定、外源基因的整合、基因捕獲及染色體工程等方面得到了有效的應用。

Cre-Loxp應用


當細胞基因組內存在兩個loxP位點時,一旦有Cre重組酶出現,就會誘導兩個loxP位點間的序列發生重組。首先,Cre重組酶結合到兩個13bp的回文序列形成二聚體,然后這個二聚體和另外一個loxP位點上的二聚體結合,形成四聚體。LoxP位點是有方向的,形成四聚體的兩個loxP位點是平行的,隨后這兩個loxP位點間的雙鏈DNA被Cre重組酶切掉,然后切口在DNA連接酶的作用下重新連接。重組的結果取決于兩個loxP位點的方向,主要有以下幾種可能:


1.如果兩個loxP位點位于一條DNA鏈上,且方向相同,Cre重組酶能有效敲除兩個loxP位點間的序列(圖1A);

2.如果兩個loxP位點位于一條DNA鏈上,但方向相反,Cre重組酶能導致兩個loxP位點間的序列翻轉(圖1B);

3.如果兩個loxP位點分別位于兩條不同的DNA鏈或染色體上,Cre酶能介導兩條DNA鏈的交換或染色體易位(圖1C)。



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產品清單
產品貨號 產品名稱
GM-0220CR01
pGMLV-CRE Lentivirus
GM-0220CR02
pGMLV-CAG-CRE Lentivirus
GM-0220CR03
pGMLV-CAG-CRE-PGK-Puro Lentivirus
GM-0220CR04
pGMLV-EF1α-iCRE-T2A-ZsGreen1 Lentivirus
GM-0220CR05
pGMLV-CMV-mCherry-CRE Lentivirus
GM-0220CR06
pGMLV-CMV-CRE-ZsGreen1-Puro Lentivirus
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LoxP位點,是位于P1噬菌體中的34bp序列,由兩個13bp的反向回文序列和8bp的中間間隔序列共同組成,間隔序列決定loxP的方向,loxP 位點的序列如下所示:

    13bp                         8bp           13bp

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Cre重組酶不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能識別特異的DNA序列,即loxP位點,使兩個loxP位點間發生基因重組。Cre重組酶無需借助任何輔助因子,可作用于多種結構的DNA底物,如線形、環狀甚至超螺旋DNA。


由于Cre/loxP系統作用方式高效簡單,Cre/LoxP定位重組系統已在特定基因的刪除、基因功能的鑒定、外源基因的整合、基因捕獲及染色體工程等方面得到了有效的應用。

Cre-Loxp應用


當細胞基因組內存在兩個loxP位點時,一旦有Cre重組酶出現,就會誘導兩個loxP位點間的序列發生重組。首先,Cre重組酶結合到兩個13bp的回文序列形成二聚體,然后這個二聚體和另外一個loxP位點上的二聚體結合,形成四聚體。LoxP位點是有方向的,形成四聚體的兩個loxP位點是平行的,隨后這兩個loxP位點間的雙鏈DNA被Cre重組酶切掉,然后切口在DNA連接酶的作用下重新連接。重組的結果取決于兩個loxP位點的方向,主要有以下幾種可能:


1.如果兩個loxP位點位于一條DNA鏈上,且方向相同,Cre重組酶能有效敲除兩個loxP位點間的序列(圖1A);

2.如果兩個loxP位點位于一條DNA鏈上,但方向相反,Cre重組酶能導致兩個loxP位點間的序列翻轉(圖1B);

3.如果兩個loxP位點分別位于兩條不同的DNA鏈或染色體上,Cre酶能介導兩條DNA鏈的交換或染色體易位(圖1C)。



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