細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。
檢測自噬形成時,使用電鏡耗時長,不利于監測(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成過程中會發生聚集的現象,因此吉滿生物利用hLC3這種現象,構建了帶GFP和RFP標記的用于細胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產品。無自噬時,RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中,在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點;自噬形成時,由于自噬小體進入第二階段后,與溶酶體進行融合,形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內部的酸性環境,可以導致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度,GFP越少,則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之,自噬小體和溶酶體融合被抑制,自噬溶酶體進程受阻。RFP是一直穩定表達的,因此通過不同顏色斑點的計數可以清晰看出自噬流的強弱。