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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
產品簡介

       細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。

        檢測自噬形成時,使用電鏡耗時長,不利于監測(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成過程中會發生聚集的現象,因此吉滿生物利用hLC3這種現象,構建了帶GFP和RFP標記的用于細胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產品。無自噬時,RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中,在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點;自噬形成時,由于自噬小體進入第二階段后,與溶酶體進行融合,形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內部的酸性環境,可以導致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度,GFP越少,則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之,自噬小體和溶酶體融合被抑制,自噬溶酶體進程受阻。RFP是一直穩定表達的,因此通過不同顏色斑點的計數可以清晰看出自噬流的強弱。


圖譜信息

image.png

產品規格
產品貨號產品名稱包裝規格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事項

1. 病毒操作時最好使用生物安全柜,如使用普通超凈工作臺操作病毒,請不要打開風機。

2. 病毒操作時請穿實驗服,帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時必須特別小心,不要產生氣霧或飛濺。如操作時超凈臺有病毒污染,立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細胞感染情況時應遵從以下步驟:擰緊培養瓶或蓋緊培養板。用70%乙醇清理培養瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗臺前,用70%乙醇清理實驗臺。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗雙手。


保存條件

-80℃保存。(保存時間以12個月以內為宜,如保存時間過長,使用前請重新檢測病毒滴度)


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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
產品簡介

       細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。

        檢測自噬形成時,使用電鏡耗時長,不利于監測(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成過程中會發生聚集的現象,因此吉滿生物利用hLC3這種現象,構建了帶GFP和RFP標記的用于細胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產品。無自噬時,RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中,在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點;自噬形成時,由于自噬小體進入第二階段后,與溶酶體進行融合,形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內部的酸性環境,可以導致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度,GFP越少,則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之,自噬小體和溶酶體融合被抑制,自噬溶酶體進程受阻。RFP是一直穩定表達的,因此通過不同顏色斑點的計數可以清晰看出自噬流的強弱。


圖譜信息

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產品規格
產品貨號產品名稱包裝規格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事項

1. 病毒操作時最好使用生物安全柜,如使用普通超凈工作臺操作病毒,請不要打開風機。

2. 病毒操作時請穿實驗服,帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時必須特別小心,不要產生氣霧或飛濺。如操作時超凈臺有病毒污染,立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細胞感染情況時應遵從以下步驟:擰緊培養瓶或蓋緊培養板。用70%乙醇清理培養瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗臺前,用70%乙醇清理實驗臺。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗雙手。


保存條件

-80℃保存。(保存時間以12個月以內為宜,如保存時間過長,使用前請重新檢測病毒滴度)


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